Akai QX-3700 User Manual download pdf (Page 41)

cjc z białkowym sub-

stratem. Obydwa płaty

połączone są tzw. re

gionem zawiasu (pętla

L-78), który decyduje

o konformacji szczeli

ny. NLS — sygnał lo

kalizacji jądrowej

(ang. nuclear localiza

tion signal); KHD —

ang. kinesin homology

domain (pętla L-9D); L

— pętla (ang. loop).

a.2, aL, a3, y3-2 —

tzw. wstawki, domeny

występujące w niektó

rych wariantach CKI.

P 0 4 - oznacza miejsce

rozpoznające i wiążące

resztę fosforanową w

białku substratowym

2. Struktura Ill-rzędowa

domeny katalitycznej

Ckil z Sch. pombe w

kompleksie z MgATP

[34], Domena katali

tyczna składa się z

dwóch płatów: N-ko-

niec cząsteczki tworzy

mniejszy płat, w któ

rym dominuje struktu

ra p. Obszar ten jest

miejscem wiązania tri-

fosfonuklcotydu. Wię

kszy płat o strukturze

a-helisy zawiera se

kwencje uczestniczące

w przenoszeniu reszty

fosforanowej. Szczeli

na, znajdująca się mię

dzy obydwoma płata

mi wchodzi w interak-

mająca bardzo krótki C-koniec nie jest aktywowana

przez heparynę, a nawet jest w niewielkim stopniu

hamowana [2 0 ].

Badania prowadzone przez grupę kierowaną przez

R o a c h wykazały, że koniec karboksylowy CKI od

grywa istotną rolę w regulacji aktywności tego enzy

mu [19]. Istnieją dowody, że fosforylacja aminokwa

sów w C-końcu jest przyczyną autoinhibicji enzymu.

Heparyna oddziałuje z C-końcem CKI5, co powodu

je zmiany konformacji kinazy naśladujące defosfo-

rylację [7]. Nie wiadomo jednak czy in vivo fosfory

lacja enzymu w C- końcu jest wynikiem autofosfory-

lacji czy też efektem działania innej kinazy białko

wej.

Podobne wyniki zostały uzyskane przez C e 

gielską i wsp. [50]. Okazało się, że CKIe za

wierająca C-koniec o długości 123 aminokwasów z

wieloma miejscami fosforylacji jest również akty

wowana przez działanie fosfatazy oraz przez ograni

czoną proteolizę.

Powyższe obserwacje dowodzą, że ufosforylowa-

ny koniec C kinazy białkowej CKI pełni funkcję in

hibitora aktywności CKI. Pełna aktywacja enzymu

możliwa jest przez:

— proteolityczne usunięcie C-końca

— defosforylację enzymu

— związanie heparyny (i przypuszczalnie innych po-

lianionów)

Przedstawiony poniżej schemat (Ryc. 3) wyjaśnia

rolę C-końca w regulacji aktywności kinazy CKI.

Wykazano, że koniec karboksylowy kinazy

białkowej CKI bierze również udział w rozpoznawa

niu substratu oraz jest odpowiedzialny za lokalizację

subkomórkową enzymu. Kinazy Ycklp, Yck2p, Yc-

k3p i Ckil są prenylowane właśnie w C-końcu, co

POSTĘPY BIOCHEMII 46(2), 2000

145

http://rcin.org.pl

1 2 ... 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 ... 94 95

Comments to this Manuals

No comments

Akai QX-3700 User Manual Page 41

Comments to this Manuals