Akai QX-3700 User Manual download pdf (Page 55)

ność centrów Nlb, N2, N3 i N4. Wartości poten

cjałów dla tych grup oksydoredukcyjnych zgadzają

się z obecnie przyjętym modelem transportu elektro

nów w obrębie kompleksu I [34], Wśród podjedno-

stek dehydrogenazy NADH kodowanych przez ge

nom jądrowy roślin najbardziej intensywnie badano

geny białek o masach 76 kDa, 55 kDa, 28.5 kDa,

22 kDa [35-38]. Wynikało to częściowo z faktu, że

geny tych podjednostek wykazują wyraźną homolo-

gię z odpowiednimi genami podjednostek komplek

su I innych organizmów, oraz że podjednostki te za

wierają charakterystyczne motywy. Grohmann i

wsp. [36] potwierdzili obecność miejsca wiązania

NADH i FMN oraz centrum N3 w podjednostce 55

kDa ziemniaka. Okazało się również, że konserwa

tywne motywy cysteinowe występujące w sekwencji

podjednostek 75 kDa, TYKY i PSST kompleksu I B.

taurus, występują także odpowiednio w podjednost-

kach 76 kDa, 28.5 kDa i 22 kDa S. tuberosum [35, 37,

38]. Wykorzystując bazę danych EST u Arabidopsis

thaliana odkryto jeszcze jedną podjednostkę o masie

24 kDa [10].

Jądrowe geny podjednostek kompleksu I charak

teryzują się obecnością małych spliceosomalnych in-

tronów zawierających dużą ilość par A+T. Stwier

dzono np. że geny podjednostki 22 kDa-PSST A. tha

liana i 55 kDaH. thaliana oraz S. tuberosum są prze

rwane jednym intronem [36, 38]. Ciekawe, że w ge

nie białka o masie 55 kDa intron jest zlokalizowany

zaraz za pierwszym kodonem (ATG).

Schmidt-

B 1 e e k i wsp. [37] stwierdzili, że gen białka żelazo-

wo-siarkowego o masie 28.5 kDa/F thaliana i S. tu

berosum jest przerwany nawet siedmioma intronami

a wielkość intronów waha się od 60 do 1700 nukle-

otydów.

Badano również ekspresję genów podjednostek

kompleksu I kodowanych przez genom jądrowy.

Wiadomo już, że ekspresja genów podjednostek

łańcucha oddechowego kodowanych przez jądro jest

6-10 krotnie wyższa w organach kwiatowych niż w

liściach i korzeniach a regulacja tych procesów jest

tkankowo-specyficzna [36]. Ciekawe, że podwyż

szoną ekspresję na poziomie RNA w organach kwia

towych zaobserwowano również dla takich białek

jak białko Fe-S Rieske (podjednostka kompleksu

III), czy też podjednostka Fip ATP-azy (podjednost

ka kompleksu V) [39, 40]. Analogiczne wyniki

otrzymano analizując ekspresję podjednostek 76

kDa, 55 kDa A. thaliana i S. tuberosum oraz 28.5

kDa-TYKY S. tuberosum i 22 kDa-PSST A. thaliana

oraz S. tuberosum [35-38]. U A. thaliana badania

ekspresji przeprowadzono analizując różne części

kwiatu. Okazało się, że wysoka ekspresja na pozio

mie RNA dotyczyła pylnika i pyłku kwiatowego

[41].

Geny kompleksu I roślin zlokalizowane w geno

mie mitochondrialnym dotyczą genów oznaczonych

jako n adl - nadó, nad4L oraz dodatkowo nad7 i

nad9. Te dodatkowe geny kodują polipeptydy homo

logiczne z białkami o masie 49 kDa i 30 kDa ssaków,

o których wiadomo, że ich geny są kodowane przez

genom jądrowy.

Ponieważ budowa genów podjednostek kodowa

nych przez genom mitochondrialny jest przedmio

tem równolegle prezentowanej pracy, w niniejszym

opracowaniu będą one pominięte.

W sumie u roślin zidentyfikowano dotychczas 14

podjednostek kompleksu I. Jest to ilość, która tworzy

tzw. „minimalny” kompleks u zwierząt i bakterii.

Należy podkreślić, że w genomie chloroplastowym

znaleziono 11 genów homologicznych z tymi czter

nastoma podstawowymi podjednostkami komplek

su I [42], Te chloroplastowe geny kodująpodjednost-

ki, które wchodzą w skład kompleksu enzymatycz

nego — NAD(P)H:plastochinon oksydoreduktaza

(Tab. 1). Sugeruje się, że funkcją chloroplastowego

kompleksu jest transport elektronów sprzężony z

translokacją protonów [43]. Ze względu na wyraźną

homologię między podjednostkami chloroplastowe

go i mitochondrialnego kompleksu przypuszcza się,

że NAD(P)H:plastochinon oksydoreduktaza ma po

dobną budowę do mitochondrialnej dehydrogenazy

NADH.

VI. Podjednostka PSST -potencjaln e miejsce

wiązania centrum N2

Po raz pierwszy podjednostka PSST została scha

rakteryzowana u gatunku Bos taurus [44, 45]. Nazwa

PSST powstała od pierwszych czterech aminokwa

sów dojrzałego białka. Obecnie znane są sekwencje

cDNA genu PSST takich gatunków jak Bos taurus

[45], Arabidopsis thaliana [38], Solanum tuberosum

[38],

Brassica olerácea

[46] oraz

Lupinus luteus

[47]. Znana jest także sekwencja cDNA ludzkiego

genu PSST [48]. W internetowej bazie danych EST

znajdują się sekwencje homologiczne z cDNA genu

PSST z takich gatunków jak Lycopersicon esculen-

tum - pomidor (AI489436), Gossypium hirsutum.-

bawełna (AI731321), Zea mays - kukurydza

(AI964559), Avena sativa - owies (AI978363). Cie

kawe, że gen PSST odkryto również w genomie mi

tochondrialnym np. u Param ecium tetraurelia [49,

50], a także u bakterii np. u Paracoccus denitrificans

[51]. Ciężar cząsteczkowy podjednostki PSST został

oszacowany na około 22kDa. Homologiem chloro

POSTĘPY BIOCHEMII 46(2), 2000

159

http://rcin.org.pl

1 2 ... 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 ... 94 95

Comments to this Manuals

No comments

Akai QX-3700 User Manual Page 55

Comments to this Manuals